Can centrifugation force compromise the plasmatic membrane, acrosome and DNA integrity of goat spermatozoa? / A força de centrifugação pode comprometer a integridade de membrana plasmática, acrossomal e DNA de espermatozoides caprinos?

Protocols for cooling or freezing goat semen usually recommend centrifugation for seminal plasma removal. However, little is known about the effect of this process on goat sperm viability and functionality. The present study evaluated the effects of centrifugation force on the plasma membrane, acrosomes, and DNA integrity of goat semen. Four ejaculates from each of the four different Anglo Nubian male goats were used. Semen samples were obtained using artificial vagina, and immediately after collection, ejaculates were diluted using Ringer's sodium lactate solution and split into three groups: Control (CG, without centrifugation), G1 (centrifugation 600 x g/10 min), G2 (centrifugation 1200 x g/10 min). After centrifugation, seminal plasma was removed, the sperm pellets were resuspended using Tris-egg yolk extender (80 x 106 spermatozoa/mL) and the sperm morphology was analyzed. Samples were cooled at 5°C for 5, 24, 36, and 48 h and then sperm plasma membrane and acrosome integrity (PMAI, %) and sperm DNA fragmentation index (SDF, %) were evaluated at each time-point, using a flow cytometer. Additionally, sperm movement was determined using computer semen analysis (CASA) after 5, 24, and 48 h of refrigeration period. The semen centrifugation did not induce additional sperm morphology defect or reduction in sperm kinetics in the experimental groups. Differences were not observed (p > 0.05) in PMAI and SDF among different groups, in any of each time-point of the cooling process. In conclusion, centrifugation, even at high speeds, did not affect goat sperm integrity and functionality when submitted to refrigeration process. (AU)

A maior parte dos protocolos de refrigeração e criopreservação do sêmen caprino recomenda o uso de centrifugação para remoção do plasma seminal. No entanto, não existe consenso sobre o risco que esse tipo de processamento pode ocasionar à viabilidade espermática. Nesse contexto, o presente trabalho investigou os possíveis efeitos deletérios da centrifugação sobre a integridade estrutural e DNA de espermatozoides caprinos. Para a pesquisa foram selecionados quatro reprodutores para colheita de sêmen (n = 4 ejaculados/bode). Cada ejaculado foi fracionado em três alíquotas iguais, diluídas em ringer e divididas em três grupos: Controle (GC, não centrifugado), G1 (centrifugação a 600 g/10 minutos) e G2 (centrifugação a 1200 g/10 minutos). As amostras seminais por grupo foram diluídas em meio Tris gema respeitando-se a concentração final de 80 milhões de espermatozoides/mL e foram submetidas à avaliação de morfologia espermática. Todas as amostras foram acondicionadas a 5°C, sendo analisadas nos momentos 5, 24, 36 e 48 horas do processo de refrigeração por meio da avaliação da integridade de membrana plasmática e acrossomal (MPAI, %) e índice de fragmentação de DNA (IDF, %). Adicionalmente, a cinética espermática foi avaliada com o emprego de um sistema computadorizado de análise (CASA) nos momentos 5, 24 e 48 horas da refrigeração. A centrifugação não induziu a manifestação de defeitos morfológicos ou redução significativa da cinética de espermatozoides caprinos. Não foram observadas diferenças para a integridade de membrana plasmática e para o índice de fragmentação de DNA quando comparados, respectivamente, GC, G1 e G2 em cada um dos quatro momentos experimentais. Conclui-se que mesmo quando empregadas altas forças de rotação não ocorre lesão à ultraestrutura dos espermatozoides caprinos submetidos ao processo de refrigeração.(AU)

Bat trypanosomes from Tapajós-Arapiuns Extractive Reserve in Brazilian Amazon / Tripanossomas de morcegos da Reserva Extrativista Tapajós-Arapiuns na Amazônia Brasileira

Abstract Trypanosoma comprises flagellates able to infect several mammalian species and is transmitted by several groups of invertebrates. The order Chiroptera can be infected by the subgenera Herpetosoma, Schizotrypanum, Megatrypanum and Trypanozoon. In this study, we described the diversity of bat trypanosomes and inferred phylogenetic relationships among the trypanosomes from bats caught in Tapajós-Arapiuns Extractive Reserve (Resex) in Pará state. Trypanosomes from bats were isolated by means of hemoculture, and the molecular phylogeny was based on the trypanosome barcode (SSUrDNA V7V8 variable region). A total of 111 bats were caught in the area, belonging to three families (Emballonuridae, Molossidae and Phyllostomidae) and 12 species. The bat trypanosome prevalence, as evaluated through hemoculture, was 9% all positive cultures were cryopreserve (100% of isolation success). Phylogenetic trees grouped nine isolates in T. cruzi marinkellei branch and only one in T. dionisii branch. Studies on bat trypanosome diversity are important for identifying pathogenic species and for generating support for control measures, especially in such areas where humans inhabit the forest with close contact with bat species. In addition, this is the first study in Resex Tapajós-Arapiuns extractive reserve and further studies should be conducted to elucidate the role of these parasites as environmental degradation biomarkers.

Resumo Trypanosoma compreende flagelados capazes de infectar diversas espécies de mamíferos e são transmitidos por diferentes grupos de invertebrados. A ordem Chiroptera pode ser parasitada pelos subgêneros Herpetosoma, Schizotrypanum, Megatrypanum e Trypanozoon. Neste estudo é descrita a diversidade de tripanossomas de morcegos capturados na Reserva Extrativista Tapajós-Arapiuns, no Estado do Pará. Os tripanossomas de morcegos foram isolados através de hemocultura e os estudos filogenéticos baseados na região de barcode de tripanossomas (SSUrDNA V7V8 região variável). Foram capturados 111 morcegos pertencentes a três famílias (Emballonuridae, Molossidae e Phyllostomidae) e 12 espécies. A prevalência dos tripanossomas de morcegos, avaliada por hemocultura, foi de 9% para as culturas positivas e todas foram criopreservadas (100% de eficiência no isolamento). As árvores filogenéticas agruparam nove isolados no ramo de T. cruzi marinkellei e um único isolado de T. dionisii. Estudos sobre a diversidade de tripanossomas de morcegos são importantes para identificar espécies patogênicas e gerar suporte para medidas de controle, principalmente em áreas silvestres com contato entre as populações humanas e de morcegos. Além disso, este foi o primeiro estudo realizado na Resex Tapajós-Arapiuns e novos estudos devem ser conduzidos para elucidar o papel destes parasitas como marcadores de degradação ambiental.

Sensitivity evaluation of the computer-assisted sperm analysis (CASA) in the determination of frozen-thawed bull semen concentration / Avaliação da sensibilidade da técnica computadorizada de análise (CASA) para a determinação da concentração espermática do sêmen bovino congelado

Sperm concentration is traditionally evaluated by counting cells in a hemocytometric Neubauer chamber, often a highly subjective, time-consuming, and laborious technique prevalent in andrology laboratories around the world. However, the Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) represents a more consistent method of evaluating sperm concentration that may provide enhancing efficiencies of sperm count. The purpose of this study is to compare the results of these two methods in the analysis of post-thaw concentration of bovine semen. Four hundred and twenty five batches of semen from different bulls were selected, thawed at 37°C for 30 seconds and then homogenized. Aliquots of 40 µL of semen were diluted in 960 µL of distilled water, fixing the rate at 1:25 dilution for analysis in a Neubauer chamber. Conversely, aliquots of 5 µL for each semen dose were submitted to CASA, considered a minimum of five random fields and 2000 sperm count per analysis. The average concentration of sperm cells was 38.96a ± 1.28 in the Neubauer analysis and 35.14b ± 0.82 for the CASA, with the correlation coefficient of 0.87 (P < 0.0001) and reliability of 0.78 (scale ranging from 0 to 1) between the two methods. In conclusion, the results of two techniques for assessing sperm concentration have similar results. However the CASA methodology would yield greater benefit due to precision, consistency, and reduced disposal issues, particularly for large processing laboratories.(AU)

Tradicionalmente, a concentração espermática é avaliada por meio da contagem de células em câmara hemocitométrica de Neubauer, técnica laboriosa adotada na rotina dos laboratórios de andrologia. Uma alternativa para essa contagem é a técnica computadorizada de avaliação espermática (CASA), método que pode aumentar a eficiência e acurácia na determinação da concentração de espermatozoides em uma amostra de sêmen. O presente trabalho relata a avaliação da sensibilidade da técnica CASA para o acesso da concentração de espermatozoides bovinos em pósdescongelação. Foram selecionadas 425 doses de sêmen de reprodutores de diferentes raças, descongeladas a 37°C por 30 segundos e homogeneizadas. Alíquotas de 40 µL de sêmen foram transferidas para tubos cônicos de 1,5 mL previamente preenchidos com 960 µL de água destilada, fixando a taxa de diluição em 1:25 para contagem em câmara de Neubauer. Em contrapartida, alíquotas de 5 µL de cada dose de sêmen foram avaliadas com o emprego do sistema CASA considerando o número mínimo de cinco campos aleatórios e 2 mil espermatozoides por análise. A concentração média de células espermáticas foi de 38,96a ± 1,28 e 35,14b ± 0,82,respectivamente para amostras avaliadas em câmara de Neubauer ou sistema computadorizado, apresentando o coeficiente de correlação de 0,87 (P < 0.0001) e concordância de 0,78 (escala de 0 a 1). Conclui-se que as duas técnicas de avaliação da concentração espermática possuem eficiência similar. No entanto, em virtude da precisão, rapidez e por dispensar a diluição prévia das amostras para a contagem, a CASA é uma alternativa para a contagem de células espermáticas em câmara de Neubauer, sobretudo para grandes centrais de produção de sêmen bovino congelado.(AU)

Nitrogen balance and milk composition of dairy cows fed with urea and soybean meal and two protein levels using sugar cane based diets / Balanço de nitrogênio e composição do leite de vacas alimentadas com ureia e farelo de soja e dois teores de proteína em dietas com cana-de-açúcar

It was evaluated the effect of feeding two levels of crude protein (CP) (low: 142 g CP/kg DM; and high: 156 g CP/kg DM) and two nitrogen sources (soybean meal and urea) to dairy cows using sugar cane as forage on microbial protein synthesis, the composition of the milk nitrogen fraction, nitrogen (N) balance and blood parameters. Twelve Holstein cows with an average milk yield of 22.0 ± 2.3 kg/day, and with 235 ± 40 days in milk were included in this study. The animals were grouped into three balanced and contemporary 4x4 Latin squares for an experimental period of 21 days. On the 15th day of each period, milk and urine samples were collected for microbial protein synthesis determination. Total excretion of urine (L/day), milk urea nitrogen (MUN) and blood urea were higher for the diets with high CP, regardless of the nitrogen source. Nitrogen efficiency was higher for cows fed diets with low CP. Cows in the final third of lactation can be fed diets with reduced CP levels, regardless of the nitrogen source, soybean meal or urea, without influencing the synthesis of microbial protein or the composition of the nitrogen fraction of milk.

Foi avaliado o efeito de dois teores de proteína bruta (PB) (baixa: 142 g de PB/kg de MS e alta: 156 g de PB/kg de MS) e de duas fontes nitrogenadas (farelo de soja e ureia) na dieta de vacas leiteiras, alimentadas com cana-de-açúcar como volumoso sobre a síntese de proteína microbiana, composição da fração nitrogenada do leite, balanço de nitrogênio (N) e parâmetros sanguíneos. Foram utilizadas 12 vacas Holandesas com produção média de 22,0 ± 2,3 kg leite/dia, no terço final de lactação (235 ± 40 dias em lactação), agrupadas em três quadrados latinos balanceados e contemporâneos 4 x 4, com período experimental de 21 dias, dos quais 14 para adaptação às dietas e os demais para coleta de amostras. A excreção total de urina (L/dia), o NUL e a ureia sanguínea foram maiores para as dietas com alta PB, independentemen- te da fonte nitrogenada. A eficiência de utilização do N foi maior para as vacas alimentadas com dietas com baixa PB. Vacas no terço final da lactação podem ser alimentadas com dietas com teores reduzidos de PB, independentemente de a fonte nitrogenada ser farelo de soja ou ureia, sem influenciar a síntese de proteína microbiana, a composição da fração nitrogenada do leite e obter maior eficiência de utilização do N da dieta.

Efeito da utilização das diferentes bases de anti-helmínticos sobre o desempenho de bezerros Nelore criados em pastagem de Brachiaria decumbens / Effect of the use of different bases of anthelmintics on performance of Nelore calves, created in Brachiaria decumbens pastures

Introdução - O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da utilização de diferentes bases de anti-helmínticos sobre o desempenho de bovinos Nelore em crescimento. Material e Métodos - Para isto foram utilizados 60 bezerros Nelore não castrados, com idade entre 12 e 15 meses e peso médio inicial 235 kg, entre os meses de fevereiro de 2005 e janeiro de 2006, alimentados todos juntos em pastagem de Brachiaria decumbens e premix de minerais à vontade. Após a pesagem inicial os bezerros foram agrupados em 5 lotes de 12 animais; o lote 1 era o lote controle, o 2 recebeu ivermectina a 3%, o 3 ivermectina a 1%, o 4 levamisol e o 5 abamectina. A cada 90 dias foram realizadas pesagens, onde foi avaliado o ganho de peso vivo no período e ganho médio diário, e nova administração da base testada. Os dados foram submetidos à analise de variância (PROC GLM),onde se avaliou o efeito do endoparasiticida utilizado, do mês da vermifugação e a interação entre tratamento e mês sobre o ganho de peso vivo e o ganho de peso médio diário. Resultados - O ganho de peso médio diário dos animais durante todo o período experimental não foi diferente entre os tratamentos, sendo observado ganhos iguais a 305,9 g, 303,5 g, 309,9 g, 303,5 g, 307,5 g para os tratamentos 1 a 5 respectivamente. Conclusão - Com isto, pode-se concluir que a vermifugação não alterou o ganho médio diário anual de bovinos Nelore no período testado.

Introduction - The aim of this study was to evaluate the effect of using different bases of anthelmintics on the performance of Nelore cattle growth. Material and Methods - For this were used 60 non-castrated Nelore calves, aged between 12 and 15 months and average live weight 235 kg, between February 2005 and January 2006, together fed on pasture Brachiaria decumbens and premix minerals at home. After the initial weighing calves were grouped into 5 batches of 12 animals; lot 1 was the control group, 2 received ivermectin at 3%, 3 ivermectin at 1%, 4 levamisole and 5 abamectin. Every 90 days were weighed, where was evaluated weight gain in the period and average daily gain, and new administration tested basis. Data were subjected to analysis of variance (PROC GLM), which evaluated the effect of endoparasiticide used the month of worming and the interaction between treatment and month on the weight gain and weight gain daily. Results - The mean weight gain of animals daily throughout the experimental period was not different between treatments was observed gains equal to 305.9 g 303.5 g 309.9 g 303.5 g 307.5 g for treatments1 to 5 respectively. Conclusion - With this, we can conclude that the deworming did not alter the annual average daily gain of Nelore cattle in the period tested.

Efeito de níveis crescentes de uréia na dieta de vacas leiteiras sobre a composição e rendimento de fabricação de queijos minas frescal / Effect of increasing level of dietary urea in diets for dairy cows on composition and yield of Minas Frescal cheese

O objetivo do trabalho foi avaliar a substituição do farelo de soja por níveis crescentes de uréia na dieta de vacas leiteiras e os seus efeitos sobre a composição e o rendimento de fabricação de queijo Minas Frescal. Para a fabricação dos queijos, foram utilizados 15 kg de leite, provenientes de nove vacas Holandesas em lactação, distribuídas em três quadrados latinos 3x3. Foram utilizadas três dietas: A) controle, formulada para suprir 100% das exigências de proteína bruta, proteína degradável no rúmen (PDR) e proteína não degradável no rúmen(PNDR), utilizando farelo de soja como principal fonte protéica; B)com a inclusão de 0,75% de uréia, em substituição parcial ao farelo de soja, e C) com inclusão de 1,5% de uréia, em substituição parcial ao farelo de soja. Todas as dietas foram iso energéticas (1,53 Mcal/kg de energia líquida de lactação) e isonitrogenadas (16% de PB) e utilizaram cana-de-açúcar como volumoso. Quando analisados por regressão polinomial simples, os resultados da composição e da fração nitrogenada do leite pasteurizado não foram influenciados pelo nívelde uréia na dieta, o mesmo ocorrendo com a composição (pH,umidade, gordura, matéria mineral, cloreto de sódio, proteína bruta, nitrogênio solúvel em pH 4,6 e em TCA 12%) e o rendimento de fabricação dos queijos. Com base nos resultados deste estudo, conclui-se que o uso de até 1,5% de uréia na alimentação de vacas em lactação não alterou a composição do leite pasteurizado, bem como a composição e o rendimento de fabricação de queijo Minas Frescal.

The aim of this study was to evaluate the substitution of soybean meal for increasing levels of dietary urea on the composition and yield of Minas cheese. For each cheese making process, 15 kg of milk were collected from nine lactating Holstein cows that were arranged in 3 Latin squares. Three diets with sugar cane as roughage were fed for cows and consisted of: A) control diet formulated to provide 100% of the requirements of crude protein (CP), rumen undegradable protein (RUP) and rumen degradable protein (RDP), using soybean meal; B) urea inclusion at 0.75% of dry matter in substitution for soybean meal crude protein equivalent; C) urea inclusion at 1.5% of dry matter in substitution for soybean meal crude protein equivalent. Energy and protein levels of rations comply with NRC (2001), and were isoenergetic and isonitrogenous. When the data were analyzed by simple polynomial regression, no effect of treatments were observed on pasteurized milk composition and milk nitrogen fractions, as well as for cheese composition (pH, moisture,fat, ash, sodium cloride, crude protein, soluble nitrogen in pH 4,6 and in TCA 12%) and cheese yield. Based on the results of this study, it can be concluded that the addition of urea up to 1.5% in dry matter basis in substitution for soybean meal in the diet of Holstein cows did not alter cheese composition and yield.

Avaliação de bioquímica sérica em cavalos da raça Puro Sangue Inglês(PSI) submetidos a treinamentos de rotina no Jockey Club de São Paulo : interferência do treinamento na saúde do eqüino atleta / Serum biochemical evaluation of Thoroughbred horses submitted to routine exercises in the Jockey Club of São Paulo: interference of exercises in health of the athlete horse

Introdução - O presente trabalho teve como objetivo avaliar a interferência do treinamento na saúde do eqüino atleta, através da análise dos níveis séricos de creatina quinase (CK), aspartatoamino transferase (AST), uréia e creatinina, em cavalos de corrida PSI do Jockey Club de São Paulo. Material e Métodos - Os animais avaliados foram submetidos a treinamentos de baixa e de alta intensidade. Para este estudo foram coletadas amostras sangüíneas de 8 animais antes e 15 minutos após treino de baixa intensidade, antes e 15 minutos após treino de alta intensidade e ainda 24 horas após treino de alta intensidade. O material assim obtido foi encaminhado ao Laboratório de Pesquisa, onde foi realizada a centrifugação das amostras sangüíneas para obtenção de soro para análise da AST, CK, uréia e creatinina. Resultados - No treino de baixa intensidade, os valores médios obtidos das amostras coletadas antes do exercício foram de 180,7 U/L para CK, 318,1 U/L para AST, 39,1 mg/dL para uréia, 1,68 mg/dL para creatinina. Não foi observada alteração estatisticamente significante desses valores, comparando-os com os obtidos 15 minutos após treinamento que foram para CK 202 U/L, AST 319 U/L, uréia 39 mg/dL, e creatinina 1,76 mg/dL. No treino de alta intensidade encontrou-se aumento estatisticamente significante para a variável creatinina, no qual se obteve antes do treino um valor de 1,55 mg/dL, em15 minutos após 1,78 mg/dL e 24 horas após1,54 mg/dL, já para as outras variáveis não foram observadas alterações significativas, e os resultados antes do treino foram 186,9 U/L para CK, 319,6 U/L para AST e 38,1 mg/dL para uréia. Em 15 minutos após exercício, os valores médios foram para CK 218,8 U/L, AST 371,5 U/L e uréia 38,3mg/dL, sendo que em 24 horas após o treino os valores médios foram para CK 153,3 U/L, AST 278,2U/L e uréia 35,6 mg/dL. Conclusões - Pelos resultados obtidos, pode-se observar que, segundo as análises realizadas, o treinamento de rotina dos eqüinos avaliados neste experimento não interferiu prejudicialmente na saúde destes animais.

Introduction - The present study had the objective of evaluating the interference of exercises in health of athlete horses through the analysis of serical levels of Creatiane kinase (CK), Aspartate Aminotransferase (AST), Urea and Creatinine in Thoroughbred race horses from The Jockey Club of São Paulo. Material and Methods - The evaluated horses were submitted to two types of training:low-intensity and high-intensity exercises. For this study, blood samples were collected from eight animals, before and fifteen minutes after low-intensity exercises, before and fifteen minutes after high intensity exercises, and twenty four hours after high-intensity exercises. The blood samples were taken to the research laboratory for centrifugation in order to obtain the serum for analysis of AST,CK, urea and creatinine. Results - In low-intensity training, the mean values obtained from samples collected before exercises, were: 180,7 U/L for CK, 318,1 U/L for AST, 39,1 mg/dL for urea and 1,68mg/dL for creatinine. No alteration, statistically significant, was observed in these values in comparison with the ones obtained fifteen minutes after exercises, which were: CK 202 U/L, AST 319U/L, urea 39 mg/dL and creatinine 1,76 mg/dL. In high-intensity training there was a statistically significant increase of the variable creatinine, which before exercises were: 1,55 mg/dL, 1,78 mg/dL in fifteen minutes after, and 1,54 mg/dL twenty four hours after. The other variables showed no significant alterations, and the results before exercises were: 186,9 U/L for CK, 319,6 U/L for AST and38,1 mg/dL for urea. In fifteen minutes after exercises the mean values were: CK 218,8 U/L, AST371,5 U/L and urea 38,3 mg/dL, and twenty four hours after exercises the mean values changed to CK 153,3 U/L, AST 278,2 U/L and urea 35,6 mg/dL. Conclusions - Through the obtained results, it was observed that according to the performed analysis the routine training to which these horses, evaluated in this study, were submitted to, brought no harm to these animals' health.

Digestibilidade in situ de cana de açúcar (Saccharum officinarum) nas formas natural ou ensilada, adicionadas ou não de uréia / In situ digestibility of sugar-cane (Saccharum officinarum) as fresh forage or silage, with or without urea

Doze ovinos com cânulas de rúmen foram empregados para comparar seis tratamentos, dispostos em um arranjo fatorial 2 x 3: cana de açúcar nas formas fresca (CAF) ou ensilada (CAS) x teores de uréia iguais a 0,0%, 0,5% e 1,0%. Foram estimadas: taxas de degradabilidade efetiva (DGE) dos alimentos volumosos, concentrações de ácidos graxos voláteis (AGV) e de nitrogênio amoniacal (N-NH3) e valores de pH do conteúdo do rúmen, além de concentrações de N-uréico no sangue. As taxas de DGE da matéria seca (MS) mostraram-se semelhantes para CAF e CAS. A adição de teores crescentes de uréia às forragens resultou em diminuição linear da DGE da MS tanto da CAF como da CAS. No caso da CAS, a DGE da fibra em detergente neutro diminuiu linearmente com concentrações crescentes de uréia. Os valores de pH do conteúdo ruminal foram maiores para CAS em relação a CAF, mas não ocorreram diferenças devidas à adição de uréia. Os teores do conteúdo ruminal em total de AGV e os de ácido propiônico foram maiores para a CAF em relação a CAS; os de ácido acético, ao contrário, foram maiores para a CAS. Os teores de N-NH3 do conteúdo ruminal foram maiores para a CAS que para a CAF. Nos tratamentos com CAF e nos com CAS, as concentrações de N-NH3 no conteúdo ruminal e de N-uréico no sangue aumentaram linearmente com maiores adições de uréia. Concluiu-se que a adição de 0,5% e 1,0% uréia às forragens frescas ou ensiladas de cana-de-açúcar não mostrou resultados satisfatórios e que CAF apresentou indícios de melhor qualidade nutricional que CAS.

Twelve rumen canulated male sheep were used to evaluate ruminal effective degradability (EDG) and volatile fatty acids (VF A), ammonia nitrogen(N-NH3) and pH of rumen contents, and blood ureic nitrogen .They received six treatments in a factorial arrangement 2 x 3: sugar cane fresh (CAF) or as silage (CAS) x urea levels of 0%, 0.5% and 1.0% for both forages. Values of EDG of CAF and CAS dry matter (DM) were not significantly different. Addition of crescent levels of urea to the forages resulted in a linear decrease of DM EDG for CAF and CAS. Considering CAS, EDG of neutral detergent fiber was linearly lower with crescent levels of urea. Ruminal contents pH values were higher for CAF than for CAS but no differences were find among levels of urea addition. Ruminal contents levels of total VFA and propionic acid were higher for CAF than for CAS; inversely, acetic acid levels were higher for CAS. N-NH3 levels of ruminal contents were higher for CAS than for CAF. For both fresh and silage treatments, N-NH3 concentrations in ruminal contents, as well N-ureic blood concentrations increased linearly with higher levels of urea addition. It was concluded that 0.5% and 1.0% urea added to fresh or ensiled forages had no satisfactory results and that CAF indicated better nutritional value than CAS.